推荐收藏！灭菌验证十大需要注意的几点

  适用于那些易于灭菌的物质，因为空气清除和蒸汽穿透对这些物质是高度有效的。例如：敞开的玻璃器皿和大口径的管道。

  例如，有盖子的空瓶（玻璃或塑料），洁净服，长软管/管子，抽气过滤器，进/出口小的便携式容器。

  一个典型的包裹品灭菌循环在灭菌前至少进行 3 次抽真空。灭菌后通过真空将负载中的蒸汽抽走。

  一般含有液体的物品不能有大的真空度，否则液体会溢出。针对液体来说高压灭菌锅循环是在没有真空度的情况下加热和冷却。蒸汽进入腔室顶部置换空气，空气推入腔室的底部并排出。

  需要仔细考虑的一个因素是选择固定装载还是可变的装载。在验证和操作灵活性之间需要一个权衡-你是否验证最大最小装载以增加生产的灵活性？下面是需要考虑的一些典型装载模式：

  固定装载/固定位置模式 意味着, 任何待灭菌装载将以完全相同的方式放置在室内。在标准作业流程（SOP）中应有负载配置的图表，因此操作者可以在脑海中再现每一个运行过程的负载。这种情况要求最少的验证运行（3），但负载配置没有灵活性。

  固定负载/可变位置模式 指负载在高压灭菌器内的位置是可变的。在 SOP 中只需一个负载列表。在测试运行过程中，验证运行应通过轮换负荷物品逐个位置论证不同位置的等效性。如果经过 3 个run的验证证明了位置的等效性那就可以停止。固定负载/可变位置的模式给操作者操作高压灭菌器时带来灵活性。针对包含不同物品的大负载来说，这样做才能够节省时间。

  可变负载配置 指腔室内物品种类和/或数量不固定。验证运行时必须表明此循环周期能够完全满足最大和最小两个负载模式。最小负载测试高压灭菌器腔室一个物品，必须证明其是最难灭菌的一个物品。

  需要不止一个液体监控装置以证明不一样的瓶子和液体能满足灭菌要求。选择液体循环监控装置时需考虑以下因素：

  理想情况下，液体监控装置所在应是最难灭菌的（最坏情况），放置在腔室内最冷点（靠近前门或在排水口正上方）。

  不要试图使用与待灭菌装载完全不通过的液体监控装置，如果液体控制需要很久来达到灭菌温度，则负载其他位置中的蛋白质可能会变性（在监控装置到达灭菌温度的过程中，可能已超出所要求的温度）。

  不要对不同组分的负载尝试控制，如果液体控制需要很久还达不到灭菌温度，则负载介质中的蛋白质将会变性（这可能已超出了控制的时候达到杀菌所需的温度）。

  可以根据相似粘度，瓶子大小和填充量大小进行分组，减少不一样的液体和瓶子所需验证测试的次数。每个液体控制将有一个与之相关的最大和最小负载配置。

  使用程序化的控制，以确保每个液体控制所使用的液体、瓶子体积、填充量，及其在腔室内的位置，在验证期间和后续操作的流程中保持一致。

  由于负载包含很多不一样物品，需要检测的位置似乎很多。在不影响物品灭菌能力或破坏物品（关注贵重物品）的情况下，将热电偶和指示剂（BI 与 CI）放入物品中也是十分艰难的。

  我们必须逐个逐个评估每个物品，确定最佳挑战方式。通常,物品必须以某种方式密封，以确保其蒸汽渗透状态不变。

  答：在软管中间刻一插槽，热电偶沿着插槽插入软管，确保用硅胶将插槽密封，如果你没有密封，则不能挑战软管。或者，将两个 10 米的软管（如有）插入热电偶后用连接器将其连接，用这种方法则不用破坏 20 米长的管子。

  答：选择一个内径与热电偶探头相近的硅橡胶管件套住它以确保不会滑落。在瓶盖上钻一个和管子外径一样大的孔。通过孔将管子插入瓶中。将探头推入管子中，推动探头直至到达瓶子中所需位置。确保它不会触碰瓶壁。对于橡胶瓶塞的瓶子，在筛子中间钻一个小孔，足以使热电偶通过。

  ● 当导线的外层塑料保护膜被切割并且有空气或蒸汽通过，就会发生一些蒸汽损耗（泄漏），有几率会使泄漏测试失败。

  ● 在腔室内的热电偶会吸冷凝水，需要在腔室外部将热电偶保护层切开以将冷凝水释放。如冷凝水通过热电偶流到验证仪电子元件，热电偶将损坏。

  ● 热电偶可能难以在不影响物品灭菌和/或破坏物品 (贵重物品)的情况下，放入物品中。

  ● 将热电偶装在密封瓶里并且不碰到内壁是很难做到的，并且降低瓶子的无菌程度。

  即使前/后校准确认符合规定标准，某些位置热电偶电阻也会发生明显的变化，因此导致数据不准确和/或不可靠。

  示例：此示例包含装载腔室内的9个热电偶。他们均匀分布在顶部，中部和底部，以及前、中、后部。

  该研究使用有线 分钟的负载腔体 。内室最大压力 2.16bar（在任何时间）相当于 122.7℃。一个探头（顶部前左）温度持续维持在123.3 °C - 123.5 °C之间。所有其他探头则在规定温度范围120.1℃ +2 ° C/-1 ° C内，在122.4 ° C 至 122.7 ° C 之间。

  温度偏差开始于加热阶段，并在灭菌和真空冷却阶段任旧存在。该设备工程师和制造商一致认为，在这个点的温度读数是不准确和不可靠的。热电偶读数与蒸汽压力读数以及其他热电偶读数不一致。因此，在这一点没有一点有用的数据。

  一个例子：当您运行验证测试时，您只认识到能不能够达到接受标准。但是，是不是真的需要摆在首位？

  重要的是要了解灭菌柜的周期及其参数。例如，是用于灭菌还是降低负荷？负载是热敏感的吗？还是能承受过度灭菌？是多孔装载（坚硬/包裹的物品）吗？还是液体？

  大多数验证部门有标准操作程序（SOP）详细说明灭菌工艺验证的要求。列出所有接受标准的完整清单。

  对于灭菌液体（非真空）和多孔装载（真空），第三阶段和第四阶段有几率存在不同的要求，例如灭菌结束时 F015（只针对液体）。

  ● 所有多孔装载程序要求结束时SAL≤10-6。所有多孔物品至少进行一次后真空循环以消除灭菌腔室内的蒸汽（阶段三和四）。

  ● 所有液体循环周期要求SAL≤ 10-6，并且F0 15，因为它们不使用真空，并自然冷却（阶段三和四）。

  ● 在整个灭菌阶段所有的温度都在 3 ° C 的变化范围内（阶段二，三和四）例如，121.1 ° C -1℃/+2 ° C。

  ● 在整个灭菌阶段，灭菌柜各探头温度在平均温度±1.0 ℃范围内，（阶段二）。

  记录验证测试期间进行的工作,就是了解需要记录的内容以及如何记录它。记录清晰、一致和一目了然,并且一定要符合所有 GMP 要求。它必须是完整的,并且必须包括以下项目:

  ● 每个记录分别标明设备 ID、负载说明、日期、测试编号和循环开始/结束时间

  当进行验证测试过程中，如果你没有良好记录，在报告时，你将没有办法进行数据分析。用不充分或不良的数据来支持验证过程将无法通过审计。

  注意谨慎使用热电偶的精确度接受标准，如果标准过高（如所有的热电偶一定要达到接受标准），如有一或两个热电偶停止工作或在测试后超出温度容许偏差，则可能会丢失大量运行。

  如果你正在进行（如，在几个星期内）大量的验证测试，你需要仔细考虑热电偶的准确度。可以在每次运行和/或在整个测试周期结束后进行。

  如果等到测试周期结束,则存在由于热电偶未满足接受验收标准而导致所有测试失效的风险。但是，在每次测试后做检查，则会大幅度提升完成测试所需的时间。每三次运行或每隔几天执行一次准确性检查是一种合理的折衷方案。正如需要注意的几点 6 指出，验证热电偶的准确度，应允许至少一个或两个热电偶失效。

  人们很容易低估验证高温灭菌器所需的时间，以及在整个验证过程中你需要做些什么。

  例如，在大多数情况下要长达四个小时进行准备，例如，准备装载，放置探头，将BI和 CI 放入负载中等。如果生产需要用高压灭菌器，你需要将探头，BI 和 CI挪出来，然后从头再来，白白浪费一天。在规划验证项目时与生产部门合作，以确保你能有足够的支配。

  另一种方法是将阶段II、阶段III（热分布）与阶段IV（热渗透）结合在一起，以节省时间。

  这三个阶段结合一起做能够大大减少完成验证的时间，不过，这样做需要仔细考虑以下几点：

  1、需要同时将探头放入墙体内和负载物上。通过高压灭菌器验证口你能安装所有的探头吗？若无法，那么你需要单独验证每个阶段，或降低探头的数量。

  2、这三个阶段结合在一起做会大幅度提升你的准备时间。如果你的时间较紧(例如，在需要在特定时间撤离的建筑工地上),，你可能没时间完成这项分析。如果发生这种情况，那么它需要完成的时间比单独做每个阶段的时间要长。

  4、还有更多的数据需要仔细考虑。进行下一个研究前，如果你只检查了几个关键点，您可能会疏忽一些不符合验证标准的内容，这可能意味着所有后续的研究处于风险之中，因为数据没办法得到证实。例如，一个探头读数可能过高。

  如果你正在进行（例如，在几个星期内）大量运行测试，那么你需要确保有足够的时间准备文件和转写报告。确保测试一天，再用一天来分析数据，也就是说，每项测试2天。同样预留充足的时间编写方案和报告，并进行审核签批（如适用）。如果你正在开发验证程序，那么这也将需要时间。

  恭喜你，你刚刚完成了一个包含不同周期和负载的新灭菌柜的验证。现在，需要那些控制，确保一致地使用经验证的装载？

  ● 准备新高温灭菌器的标准操作程序（SOP）。对每个验证程序必须有明确的指引，包括负载图。应准备新高压灭菌器的标准操作程序 (SOP)。它必须包括每个经过验证的周期的明确准则,包括负载配置图。要求一个典型操作员按照SOP做相关操作来检查SOP的清晰度。

  ● 采用基于风险评估的方法制定检修指南，包含在 SOP 里。制造商的文件和网站可能有常见故障的详述。

  ● 对于高压灭菌器和装载来说，持续再确认程序是必需的，频率可为 6，12 或 24 个月。